《隔壁人妻》无删减版,小舞用她的丝袜给我自慰,女人自慰最爽10个姿势,亚洲精品无码一区二区

細胞簡介：

大約 85%的卵巢癌來源于卵巢表面上皮，它的發(fā)生是一個多因素作用、多基因參與、經(jīng)過多個階段才終形成的及其復雜的生物學過程。因此，體外培養(yǎng)卵巢表面上皮細胞為研究卵巢表面上皮的功能及其逐步癌變過程對卵巢癌的防治起著重要作用。此外，有研究表明，表皮生長因子對卵巢表面上皮細胞的生長和狀態(tài)十分有益。

細胞特性：

1）組織來源于實驗動物的正常卵巢組織。

2)細胞鑒定：細胞角蛋白-19（CK-19）熒光染色為陽性。

3)經(jīng)鑒定細胞純度高于90%。

4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。

5)細胞生長方式：圓形、卵圓形或多角形細胞，不規(guī)則細胞，貼壁培養(yǎng)。

推薦培養(yǎng)基：

我們推薦使用 Delf 原代上皮 細胞 培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。

實驗報告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將組織剪成1mm3左右大?。?/span>

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；

2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；

5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

注意事項：

1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。

2. 仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關(guān)信息，如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子等，確保細胞培養(yǎng)條件一致，若由于培養(yǎng)條件不一致而導致細胞出現(xiàn)問題，責任由客戶自行承擔。

3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題，部分細胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片，是正?，F(xiàn)象。觀察好細胞狀態(tài)后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置4-6h。

4. 貼壁細胞可以消化，懸浮細胞直接混勻收集細胞，900 rpm-1000 rpm離心3 min，棄上清。加5 mL PBS重懸細胞，再900 rpm-1000 rpm離心3 min，，用新鮮的*培養(yǎng)基重懸細胞，并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中，置于培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。

5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。

6. 建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài)，便于和我司技術(shù)部溝通交流。由于運輸?shù)脑?，個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián)系，告知細胞的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。

7. 該細胞僅供科研使用。

8. 備注：運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細胞，請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。收到細胞后次傳代建議1：2傳代 。

9.注意： 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿。

公司正在出售的產(chǎn)品：

細胞摩羅利（MALLORY/PERLS）鐵（三價）染色試劑盒

石蠟切片脂質(zhì)過氧化物4-羥基壬烯醛（4－HNE）熒光染色試劑盒

大鼠組織型纖溶酶原激活劑(t-PA) elisa檢測試劑盒

血液糖胺多糖（GAG）總含量阿爾新藍（alcian blue）比色法定量檢測試劑盒

小鼠白介素33(IL33)elisa檢測試劑盒

大鼠磷酸化乙酰A羧化酶(pACCase)elisa檢測試劑盒

動物軟組織線粒體可溶性總蛋白制備試劑盒

食蟹猴胰高血糖素(GC)elisa檢測試劑盒

通用型雞病毒性關(guān)節(jié)炎呼腸孤病毒（Reovirus；REO）基因

GSH2蛋白抗體 GSH2

G蛋白偶聯(lián)受體34抗體 GPR34

腦腸肽O?；D(zhuǎn)移酶/Ghrelin O acyltransferase抗體 MBOAT4

擬南芥IKI3抗體 ELP1

二?；视王；D(zhuǎn)移酶2樣蛋白3抗體 DGAT2L3

防御素β-118/β-defensin 118抗體 DEFB118

羊抗抗體 human Fibrinogen

胰腺彈性蛋白酶3B抗體 Elastase 3B

SFXN5蛋白抗體 SFXN5

S期細胞周期相關(guān)蛋白抗體 SPHAR

源盒蛋白HOXD10抗體 HOXD10

脫氧胞苷激酶抗體 DCK

膠質(zhì)細胞谷運載蛋白2抗體 EAAT2

精神分裂癥相關(guān)蛋白9抗體 RGS4

6號染色體開放閱讀框203抗體 C6orf203

AF680標記的髓樣細胞白血病-1抗體 MCL1, Alexa Fluor 680 conjugated

田鼠睪酮(T)elisa分析檢測試劑盒

綿羊Ⅱ型膠原(Col Ⅱ)elisa分析檢測試劑盒

血液丙二醛（MDA）比色法定量檢測試劑盒

小鼠骨成型蛋白受體1A(BMPR-1A)elisa檢測試劑盒

大鼠卵巢表面上皮細胞大鼠白介素1α（IL－1α）elisa檢測試劑盒