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① 組織塊培養(yǎng)法

組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

② 消化培養(yǎng)法

③ 懸浮細胞培養(yǎng)法

對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

④器官培養(yǎng)

器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

產(chǎn)品名稱：小鼠結(jié)腸黏膜上皮細胞

英文名稱：Mouse Colonic Mucosal Epithelial Cells

組織來源：結(jié)腸組織

產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

小鼠結(jié)腸黏膜上皮分離自結(jié)腸組織；結(jié)腸在右髂窩內(nèi)續(xù)于盲腸，在第3骶椎平面連接直腸。結(jié)腸分升結(jié)腸、橫結(jié)腸、降結(jié)腸和乙狀結(jié)腸4部分，大部分固定于腹后壁，結(jié)腸的排列酷似英文字母“M"，將小腸包圍在內(nèi)。結(jié)腸橫切面由內(nèi)到外依次為：黏膜（上皮層、固有層、黏膜肌層），黏膜下層（疏松結(jié)締組織），肌層（內(nèi)環(huán)形、外縱行兩層平滑?。饽ぃɡw維膜或漿膜）。腸黏膜上皮細胞是機體內(nèi)外環(huán)境的重要屏障，持續(xù)暴露于大量抗原中，也是機體面對病原微生物的道防線。因此，腸黏膜上皮細胞除有吸收、分泌和轉(zhuǎn)運等重要生理功能之外，在黏膜先天性和獲得性免疫防御機制中也起著重要作用。腸黏膜上皮細胞作為先接觸抗原的細胞，在黏膜免疫反應的起始階段發(fā)揮關鍵作用，它決定黏膜免疫反應的發(fā)生、性質(zhì)和強度。探討正常結(jié)腸黏膜上皮細胞的分離、體外培養(yǎng)方法，為研究腸黏膜上皮細胞以及與腸黏膜相關疾病建立合適的細胞模型。

公司實驗室分離的小鼠結(jié)腸黏膜上皮采用先機械分離法、后膠原酶消化法并通過上皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測

公司實驗室分離的小鼠結(jié)腸黏膜上皮經(jīng)Cytokeratin-18免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 上皮細胞樣

傳代特性 可傳1-2代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

取材→分離→培養(yǎng)和維持

1、取材

人和動物細胞的取材是原代細胞培養(yǎng)成功的首要條件，直接影響細胞的體外培養(yǎng)。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鮮和保鮮

② 應嚴格無菌

③ 防止機械損傷

④ 去除無用組織和避免干燥

⑤ 應注意組織類型、分化程度、年齡等

⑥ 作好記錄

2、分離

人或動物體內(nèi)(或胚胎組織)由于多種細胞結(jié)合緊密，不利于各個細胞在體外培養(yǎng)中生長繁殖，必須將現(xiàn)有的組織塊充分散開，使細胞解離出來。

(1)懸浮細胞的分離方法

組織材料若來自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料，的方法是采用1000r/min的低速離心10分鐘。經(jīng)離心后由于各種細胞的比重不同可在分層液中形成不同層，這樣可根據(jù)需要收獲目的細胞。

(2)實體組織材料的分離方法

對于實體組織材料，由于細胞間結(jié)合緊密，為了使組織中的細胞充分分散，形成細胞懸液，可采用機械分散法(物理裂解)和消化分離法。

① 機械分散法

特點:簡便、快速,但對組織機械損傷大，而且細胞分散效果差,適用于處理纖維成分少的軟組織。

② 消化分離法

組織消化法是把組織剪切成較小團塊(或糊狀)，應用酶的生化作用和非酶的化學作用進一步使細胞間的橋連結(jié)構(gòu)松動，使團塊膨松，由塊狀變成絮狀，此時再采用機械法，用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩，使細胞團塊得以較充分的分散，制成少量細胞群團和大量單個細胞的細胞懸液，接種培養(yǎng)后，細胞容易貼壁生長。

大鼠白介素13(IL-13)檢測試劑盒 ，英文名： IL-13 ELISA Kit

Mouse pyruvate kinase M2 isoenzyme (M2-PK) ELISA Kit 小鼠酸激酶M2型同工酶(M2-PK)檢測試劑盒

ELISA 小鼠IP-10(mouse IP-10)  進口分裝

CLIAKitforIL-2RELISAKit大鼠白介素2受體

通用型艱難梭菌(Closidiumdifficile)試劑盒20次

ELISAKitPF-4/CXCL4大鼠血小板因子4

Spike中東呼吸綜合征 MERS-CoV (HCoV-EMC/2012) Spike Protein fragment (aa 383-502, Fc 標簽) Protein

Tetracycline/OVA 四環(huán)素偶聯(lián)雞卵白蛋白 2mgTetracycline/OVA 四環(huán)素偶聯(lián)雞卵白蛋白

FGFR2重組人 FGFR2 / CD332 蛋白 Protein

CST8 Protein Human 重組人 Cystatin-8 / CST8 蛋白 (Fc 標簽)

ACP5 Protein Human 重組人 ACP5 / TRAP 蛋白

Tetracycline/OVA 四環(huán)素偶聯(lián)雞卵白蛋白 2mgTetracycline/OVA 四環(huán)素偶聯(lián)雞卵白蛋白

CST8 Protein Human 重組人 Cystatin-8 / CST8 蛋白 (Fc 標簽)

Spike中東呼吸綜合征 MERS-CoV (HCoV-EMC/2012) Spike Protein fragment (aa 383-502, Fc 標簽) Protein

ACP5 Protein Human 重組人 ACP5 / TRAP 蛋白

FGFR2重組人 FGFR2 / CD332 蛋白 Protein

小鼠內(nèi)皮型合成酶3(eNOS-3)ELISA 試劑盒 96T/48T

People of coicosterone / coicosterone (CO) ELISA Kit 人皮質(zhì)酮/腎上腺酮(CO)檢測試劑盒

HumanAcylationStimulatingProtein,ASPELISAKit 人酰化刺激蛋白(ASP)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

Human8-isoprostaglandin,8-iso-PG檢測試劑盒人8異前列腺素(8-iso-PG)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

正常大鼠(SpragueDawley)腎組織微粒體組分(5毫克/毫升)500微升

Mouseai-IgEreceptoraibodyELISAKit小鼠抗IgE受體抗體檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠結(jié)腸黏膜上皮細胞小鼠抗血小板抗體IgG   英文名稱：   Mouse Aiplatelet aibody   規(guī)格：      英文縮寫：   APAb

小鼠載脂蛋白AI   英文名稱：   Mouse Apolipoprotein AI   規(guī)格：      英文縮寫：   Apo-AI

小鼠載脂蛋白B   英文名稱：   Mouse Apolipoprotein B   規(guī)格：      英文縮寫：   Apo-B

小鼠載脂蛋白E   英文名稱：   Mouse Apolipoprotein E   規(guī)格：      英文縮寫：   ApoE

視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進行。

1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養(yǎng),如無法立刻進行復蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。

T-25培養(yǎng)瓶充滿培養(yǎng)基后進行常溫運輸;收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。

本公司的所有產(chǎn)品僅用于科學研究或者工業(yè)科研等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用